Elisa檢測實驗有很多關(guān)鍵技術(shù)點，在前面的資訊內(nèi)容中也為大家介紹過不少。今日，我司要為大家講解ELISA試劑盒實驗加樣中的注意事項，以供大家參考：
   

1.細胞上清：前處理必須是細胞離心去除，每孔直接加100μl即可。如果濃度太高需稀釋時，用標準品稀釋液直接稀釋。
   

2.腦脊液：前處理必須是細胞離心去除，每孔直接加100μl即可。如果濃度太高需稀釋時，用標準品稀釋液直接稀釋。
   

3.血清血漿：請加入50ul樣本分析緩沖液后加50ul標本,如稀釋量大，請將樣本與樣本分析緩沖液等量加入，不足部分用標準品稀釋液補充至100ul。   

A 血清標本應是自然凝固后，取上清，避免在冰箱中凝固血液；    

B 血漿標本，推薦用EDTA的方法收集若待測樣本不能及時檢測，標本收集后請分裝，凍存于－20℃，避免反復凍融。

C 血清標本不應添加任何防腐劑或抗凝劑；

D 標本應清澈透明，檢測前樣本中如有懸浮物應通過離心去除。

E 請勿使用溶血，高血脂或污染的標本檢測，否則結(jié)果將不準確。

4.組織勻漿液的樣本，要制備過程中需要在緩沖液中加入蛋白酶抑制劑，防止蛋白成份被內(nèi)源性蛋白酶降解，造成檢測結(jié)果的值偏低。
   

因組織勻漿液的樣本蛋白種類多，含量豐富，實驗參照血清血漿標本的處理方法進行，否則就會影響實驗結(jié)果。具體是加入50 ul樣本分析緩沖液后加50 ul標本，需稀釋時，請將樣本與樣本分析緩沖液等量加入，不足部分用標準品稀釋液補充至100ul。
                  

因為目標蛋白不同，可能造成降解的蛋白類型可能不一樣，如果實驗前通過文獻確定用哪種蛋白酶抑制劑，有針對性加入，可節(jié)省抑制劑。如果查不到相關(guān)文獻，可采用組合抑制的辦法確保蛋白不易被降解。 
   

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